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液相色譜柱預(yù)防損壞的幾項(xiàng)重要舉措

更新時(shí)間:2020-06-23      點(diǎn)擊次數(shù):1285
   在液相色譜柱的使用過(guò)程中,往往我們會(huì)發(fā)現(xiàn)很多實(shí)驗(yàn)室會(huì)面臨色譜柱頻繁損壞的問(wèn)題。這些損壞來(lái)源于主要包括:
  1.泵頭密封圈的磨損
  2.進(jìn)樣閥轉(zhuǎn)子密封圈的磨損
  3.析出的緩沖鹽
  4.樣品中的復(fù)雜易吸附基質(zhì)
  其實(shí),在工作過(guò)程中大多數(shù)的顆粒物堵塞導(dǎo)致的色譜柱背壓升高問(wèn)題是體現(xiàn)在柱頭堵塞。而樣品的易吸附機(jī)制也可能會(huì)和柱前端的硅膠表面游離的硅醇基發(fā)生作用導(dǎo)致色譜柱背壓升高。但是這種情況在較低的PH系統(tǒng)中會(huì)有所改善,因?yàn)檩^低的PH系統(tǒng)會(huì)降低硅膠表面的硅醇基發(fā)生解離。
  液相色譜柱如何預(yù)防損壞措施
  1、在液相系統(tǒng)中加入在線(xiàn)過(guò)濾器
  在線(xiàn)過(guò)濾器的內(nèi)部顆??障兑话闶?.5微米,對(duì)于UHPLC會(huì)選擇0.2微米空隙的在線(xiàn)過(guò)濾器。這個(gè)空隙尺寸和柱頭的過(guò)濾篩板尺寸接近或者略小。
  所以,在線(xiàn)過(guò)濾器能夠有效的阻隔來(lái)自樣品、泵頭密封墊、自動(dòng)進(jìn)樣器的轉(zhuǎn)子密封墊的顆粒物,以防止柱頭過(guò)濾篩板的堵塞。
  注意:但是對(duì)于非常低死體積的液相系統(tǒng),在線(xiàn)過(guò)濾器的加入可能會(huì)導(dǎo)致系統(tǒng)死體積增大峰展寬變嚴(yán)重的問(wèn)題。而對(duì)于大多數(shù)的液相系統(tǒng)而言,色譜圖不會(huì)有太大變化。
  2、在柱子前端使用保護(hù)柱
  保護(hù)柱有很多種,通用型、一體式、卡套式,但是它其實(shí)是一個(gè)和分析柱固定相相同的10-20mm的小柱子。
  因?yàn)樗哂泻头治鲋嗤膬?nèi)部填料,所以保護(hù)柱不僅可以阻隔顆粒物,還可以阻隔易吸附的樣品基質(zhì)組分。
  注意:由于保護(hù)柱中可能有大量的強(qiáng)保留組分,在用強(qiáng)溶劑清洗系統(tǒng)時(shí)請(qǐng)取下保護(hù)柱,以防止這些強(qiáng)保留組分被洗脫進(jìn)分析柱。保護(hù)柱如果出現(xiàn)吸附飽和也可能會(huì)對(duì)分離效果有影響
  3、對(duì)樣品進(jìn)行凈化處理
  有一些液相的分析方法沒(méi)有明確標(biāo)注樣品的凈化,但我希望大家在做分析時(shí)都能夠考慮樣品的凈化,常用的方案是對(duì)樣品進(jìn)行過(guò)濾。
  在實(shí)際工作中,色譜柱的儲(chǔ)存也會(huì)影響柱子的使用壽命。那么對(duì)于色譜柱的儲(chǔ)存,也有以下建議:
  短期儲(chǔ)存時(shí)
  應(yīng)該保存在接近常用的流動(dòng)相條件下。并且,一定要移除系統(tǒng)中的緩沖鹽、酸等。
  長(zhǎng)期儲(chǔ)存時(shí)
  將色譜柱按照說(shuō)明書(shū)的要求保存在對(duì)應(yīng)的溶劑中,并且將色譜柱從系統(tǒng)中取下兩頭用堵頭堵死。

液相色譜柱

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