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液相色譜柱的壽命與日常維護(hù)密切相關(guān)

更新時(shí)間:2020-01-16      點(diǎn)擊次數(shù):1274
   液相色譜是一種高效的分析手段,液相色譜柱是色譜分析系統(tǒng)的“心臟”,由于被分析樣品種類繁多,加之樣品基質(zhì)復(fù)雜,色譜柱極易被強(qiáng)保留物質(zhì)污染。這些強(qiáng)保留物質(zhì)通常難以洗脫,多次上樣后,聚集在柱頭端,堵塞篩板,甚至可能與填料發(fā)生相互作用導(dǎo)致填料變性,這會(huì)導(dǎo)致柱效下降,分離度降低和峰型異常等現(xiàn)象。因而液相色譜柱的維護(hù)是十分必要的。
  要知道液相色譜柱的壽命除了與分析的樣品和流動(dòng)相以及使用頻率有關(guān)外,主要的是與日常維護(hù)密切相關(guān)。由于衡量其壽命主要看柱效和柱壓,因此消除引起柱效降低和柱壓升高的因素成為延長(zhǎng)色譜柱壽命的關(guān)鍵。具體維護(hù)注意如下:
  1、流動(dòng)相的PH:由于色譜柱硅膠基質(zhì)填料中存在Si-C和Si-O鍵,流動(dòng)相的PH值超出范圍會(huì)導(dǎo)致基質(zhì)溶解和碳鏈斷裂,使得柱效下降,并且無(wú)法恢復(fù),因此需嚴(yán)格控制流動(dòng)相的PH。
  2、去除樣品和流動(dòng)相中的固體顆粒:固體顆粒會(huì)堵塞色譜
  柱篩板,不僅會(huì)導(dǎo)致柱壓升高,同時(shí)由于堵塞會(huì)引起液流不均勻,導(dǎo)致色譜峰拖尾,變寬,分叉等現(xiàn)象,從而使柱效下降。因此分析前對(duì)樣品和流動(dòng)相的超聲和過(guò)濾處理是必須的步驟。尤其對(duì)加了緩沖鹽的流動(dòng)相更要注意。
  3、正確使用緩沖鹽:緩沖鹽可以提供離子平衡的反離子,
  并使流動(dòng)相保持一定的離子強(qiáng)度和PH值,減少拖尾。緩沖鹽易溶于水,不溶于有機(jī)溶劑,因此不當(dāng)使用會(huì)致其析出,堵塞色譜柱,同時(shí)阻礙鍵合硅膠的碳鏈自由舒展,使色譜柱保留能力下降,柱效降低。正確使用緩沖鹽目的就是防析出,總結(jié)成一句就是---使用前要過(guò)渡,使用后要沖洗。
  4、每次做完分析,都要進(jìn)行沖洗,分析用活動(dòng)相中若無(wú)酸、堿、鹽類物質(zhì),建議用90%甲醇沖洗30~60min;若分析用活動(dòng)相中含以上物質(zhì),要先用10%甲醇(或用與分析用活動(dòng)相同比例,把含酸、堿、鹽溶液換成水)沖洗1小時(shí)左右,再梯度走到90%甲醇沖洗30~60min(若用多元泵)。有必要時(shí)再循環(huán)幾次,可以適當(dāng)縮短時(shí)間。若長(zhǎng)時(shí)間不用該色譜柱,要沖洗好后,用純甲醇或乙腈封存。

液相色譜柱

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